sábado, 15 de octubre de 2011

TECNICA DE CUENTA DE HUEVOS EN HECES LA TECNICA DE STOLL.
OBJETIVO
En esta práctica aprenderemos a realizar un método cuantitativo sobre la presencia de huevecillos.

FUNDAMENTO
Esta técnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923, debido a sus características de accesibilidad en costo y material a utilizar es uno de los más empleados de manera exitosa en encuestas epidemiológicas.

Después de identificar un parasito, puede ser necesario determinar la intensidad de la infestación. Por lo general, la sintomatología de las enfermedades parasitarias se correlacionan con el numero de parásitos presentes, se conoce la eliminación diaria de huevecillos de varias especies de helmintos. Por lo tanto, se hace una estimación del número. Sobre los resultados tienen influencia muchas variables, como dieta, mala ingestión, los ciclos de producción de huevos y la  consistencia de las heces. Pero las cuentas que se realizan antes y  durante el tratamiento, permite guiarlo y las realizadas después se servirán como referencia para el éxito mismo.los mejores resultados s logran cuando las cuentas se realizan en muestra sucesivas obtenidas en un periodo de varios días, de manera que se pueda determinar el promedio diario de liberación de huevos.





MATERIAL
·         Tubo cónico
·         Aplicador
·         Cuentas de vidrio
·         Portaobjetos
·         Cubreobjetos
·         Microscopio
REACTIVOS
·         Hidróxido de sodio
MUESTRA BIOLÓGICA
·         Heces

PROCEDIMIENTO

1.- Llenar el tubo cónico con hidróxido de sodio 0.1N hasta la marca 5.6 ml.


2.-Con un aplicador agregar heces hasta llegar a la marca 6ml del tubo cónico.


3.-Se añaden 5 cuentas de vidrio se tapa y se agita hasta que las heces se desmoronen por completo.


4-Cuando las heces estén disueltas por completo se agita el tubo un minuto y de inmediato se toman 0.075ml de la suspensión y se colocan en un portaobjetos.


5.- Se coloca el cubre objetos.


6.- Se observa en el microscopio.




 OBSERVACIONES
 En la primera muestra se observa restos de alimentos y fibras.
COMENTARIOS
Es una practica muy fácil y rápida de realizar, ya que en las practicas anteriores solo se puede saber si hay presencia de huevecillos, sin en cambio esta es una técnica cuantitativa que te permite ver la presencia de  estos y en que intensidad se presentan. En esta ocasión no encontramos el objetivo pero si ejecutamos correctamente nuestro procedimiento.
Calculo:
1.-La disolución fecal original es el de 1 en 15(4ml/60m,). Como se contaron los huevos en un volumen total de 0.15ml, el numero total de estos en 1ml de heces se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100(1/5 X 0.15 x 100=1).

2.-Suponiendo que el promedio de una persona rebasa los 100g de heces por día, es posible calcular el número de huevos por día multiplicando el resultado por 100(o la cuenta de la suspensión original por 10000).

3.-Para determinar el número de parásitos hembras presentes, se divide el número diario de huevecillos que hay en las heces entre el número promedio de:
Hembra de la especie necátor: 7000 huevos/día.
Hembra de la especie Áscaris: 200000 huevos/ día.
Hembra de la especie Thichuris: 7500 huevos/ día.

4.-Se encuentra la cantidad total de parásitos al multiplicar por dos resultados encontrados en el paso tres, ya que se supone que en cualquier infestación hay un parasito macho por cada parasito hembra.

5.-Algunos técnicos creen que deben utilizar los factores de correlación de la consistencia de las heces para obtener resultados más exactos. Para esto, se debe multiplicar el numero que se obtiene en el paso uno para el factor apropiado. Heces formadas=1, blandas formadas=1.5, blandas diarreicas=3, fluidas diarreicas=4, muy liquidas=5.



 citlaly arteaga - 3dm

lunes, 26 de septiembre de 2011

TECNICA DE FAUST

OBJETIVO
Buscar en las muestras biológicas la presencia de los distintos parásitos para tener un conocimiento más amplio sobre ellos.
FUNDAMENTO:
Se conoce como técnica de Faust, ya que fue él quien la diseño en 1938. Es una de las más populares, se utiliza prácticamente en todos los laboratorios del sector salud y privados.
Ventaja y Desventajas
Esta técnica es mejor para quiste y protozoos que para huevos y larvas de helmintos. El éxito depende de la exactitud en la densidad del sulfato de Zinc. El contacto prolongado con el sulfato de zinc, puede deformar los quiste y dificultar su identificación, por lo tanto estas preparaciones debe ser examinan lo antes posible

MATERIAL

·         Porta objetos.
·         Cubreobjetos.
·         Gasas.
·         Tubos de ensayo.  
       Embudo
             Solución acuosa de sulfato de Zn.
Baso de presipitado
 Abate lenguas

Muestras biológicas

·         Heces





PROCEDIMIENTO:

1) Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.




2) Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un embudo pequeño.




3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.





4) Decantar el liquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Re suspender el sedimento.



5) Repetir el procedimiento hasta 2 veces hasta que el liquido sobrenadante este listo.





6) Decantar nuevamente el líquido sobrenadante remplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minutos por 1500 rpm.








7) Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del liquido. Colocarlos en un porta-objeto y mezclar con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto







8) Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

Método indicado para el diagnostico de huevos livianos de helmintos (Necator, Tricocefalos, Áscaris, H.nana).



Observaciones




                   

En la primera muestra trabajada solo encontramos grasa.               



En la segunda muestra trabajada se observaron jabones, residuos vegetales grasa y fibra.



CONCLUSIONES

La finalidad de la practica es la búsqueda de parásitos hasta el momento no hemos encontrado. Con la práctica continua llegaremos a encontrarlos. En las practicas anteriores  y en esta ultima solo hemos hallado grasa, fibra .y restos vegetales e incluso creímos encontrar una amiba pero  no era así solo se trataba de una fibra.

domingo, 25 de septiembre de 2011

METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS

METODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN DE WILLIS

FUNDAMETO: este método esta recomendado especialmente para la investigación de protozoarios y helmintos. Consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio.
Los huevos y quistes de peso específico a la solución de cloruro de sodio tienden a flotar.
PROTOZAORIOS:
Son animales unicelulares que se presentan aislados o en colonias y varían en morfología y fisiología.
Los protozoarios dañan, afectan y se reproducen en las siguientes partes cavidades, sangre, intestinos, tejidos.
Estos animales pueden vivir en el aire, tierra y agua (Vida libre) y también pueden vivir como parásitos en otro ser vivo (agente o huésped) también se pueden encontrar en un huésped intermediario o en uno definitivo.
Los protozoarios en su mayoría son heterotrofos y tienen las siguientes funciones reproducción, nutrición excreción y protección.
Se transmiten en forma directa e indirecta por medio del agua, alimentos contaminados, tierra y materia fecal y pueden ser por 4 vías aérea, oral, cutánea y cavidades.

MATERIAL:
Vaso de precipitados
Embudo
Gasa
Porta objetos
Cubre objetos  
Abate lenguas

REACTIVOS:
Sol. Saturada de NaCl
Sol. De yodo lugol

MATERILA DE SEGURIDAD:
Bata
Cubre bocas
Guantes

PREOCEDIMIOENTO:
1.-  tomar aprox. 1 gr de heces fecales con un abate lenguas

2.-  en vaso de precipitados poner 10ml de solución saturada de cloruro de sodio, echarle el gramo de heces fecales y disolver.

3.-  en el embudo con la gasa ya puesta en forma de cono, se filtra la mezcla a forma que caiga en e tubo de ensaye llenando completamente el tubo.

4.- coloque un porta objetos con cuidado sobre le tubo, de manera que el liquido haga contacto con el cubre objeto

5.- dejar reposar de 5 a 10 minutos

6.- los quiste o huevos flotaran y quedara adheridos a la cara del porta objetos que esta en contacto con la mezcla.

7.- retirar cuidadosamente el porta objetos para evitar perdida de material, colocar una gota de yodo lugol y ponerle el cubre objetos.

8.- examinar la muestra al microscopio con objetivo 40x, buscando quistes o huevecillos de parásitos.


CONCLUCION: este método se aplica en consultorios.
 OBSERVACINES: lo que observamos fueron quistes de E.Hirtolytica





frotis directo

COPROPARASITOSCOPIO DIRECTO
(METODO DIRECTO “FROTIS”)

FUNDAMENTO: Este método solo sirve para evidenciar de un determinado parasito y se trata de un método cualitativo que no permite conocer el numero de formas larvaria que hay por cada gramo de heces y por lo tanto la carga parasitaria.

MATERIAL:
Porta objetos
Cubre objetos
Pipeta Pasteur
Vaso de precipitados
Microscopio

MATERIAL DE SEGURIDAD:
Bata
Cubre bocas
Guantes

SUSTANCIAS:
Sol. Fisiológica al 0.9%
Sol. De yodo

PROSEDIMIENTO:
1.- sobre le cubre objetos se toma una pequeña porción de materia fecal (lo que se vea con moco o sangre)


2.- se le agrega una gota de sol. Fisiológica

3.- se coloca el cubre objetos 

4.- se observa primero pero sin teñir

5.- en otro porta objetos limpio se repite el mismo procedimiento anterior pero ahora se tiñe con la tinción de yodo


CONCLUCION: Es importante que los frotis no sean densos (gruesos), sino transparentes (delgados), y que se haga la observación con diferentes muestras, tras la observación de trofozoitos se utiliza la tinción de yodo esto es para que se tiñan los quistes y destaquen sus detalles(los trofoziotos mueren y resultan identificables).
OBSERVACIONES: aquí lo que se observo fue solo células, residuos de comida, residuos vegetales, popo no diluid.