CONTEO DE ERITROCITOS

OBJETIVO:

saber contar los eritrociotos e utilizar la cama de neubauer 

FUNDAMETNO:

La Biometria Hemática también denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina de mayor importancia, ya que la información que de aquí se deriva nos proporciona una idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques:

Formula Roja: Determina los parámetros relacionados con el eritrocito.

Formula Blanca: Determina los parámetros relacionados con los leucocitos.

Los glóbulos rojos contienen hemoglobina, que transporta oxígeno. La cantidad de oxígeno que los tejidos corporales reciben depende de cuántos glóbulos rojos tenga usted y de qué tan bien funcionen

MATERIAL:

camara de neubauer

pipeta de globulos rojos(de toma)

gasas

sangre

REACTIVOS:

diluyente de globulos rojos: cloruro de sodio al 0.9%

diluyente de hayem 

 

PROCEDIMIENTO:

1.- mezclar la sangre obtenida con el aticoagulante

2.-llenar la pipeta de globulos rojos con sangre hasta la marca de 0.5 para realizar una dilucion de 1/200 limpiar la punta con una gasa o papel absorvente.

3.-intoducir la pipeta en el tubo que contiene diluyente hayem y llenar de liquido asta la marca de 101.

4.-se coloca en un rotador automatico o se rota manualmente de 2 a 3 min.

5.- agitar bien la pipeta y descartar de 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de el extremo de la camara para que por capilaridad se llene exactamente.

6.- colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula en 10x luego con el objetivo 40x contar sobre el cuadrado grande central de la camara solo 5 cuadros pequeños: uno central y 4 angulares (80 cuadritos en total)

7.-en el recuento se incluyen las celulas que cubren o tocan por dentro o por fuera las lineas limitantes superior e izquierda en el cuadrado pequeño de recuento y no se concideran los correspondientes a los limitesinferior derecho.

RESULATADOS:

Nº de hematies x mm3=altura x dilucionx area 

Nº de hematies x mm3=1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000

Nº de hematies x mm3= hematies contados x 10 000

VALORES DE REFERENCIA:

hombres: 4 500 000 - 5 500 000

mujeres: 4 000 000 - 5 000 000

niños: 4 200 000 - 5 200 000

R.N : 5 000 000 - 6 000 000

 citlaly- 4 dm

BIOGRAFIA:

http://html.rincondelvago.com/biometria-hematica.html
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003644.htm

PUNCION CAPILAR

Objetivo.

REALIZAR CORRECTAMENTE EL PROCEDIMIENTO DE LA PUNCION CAPILAR.

Fundamento:

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter

MATERIAL:

·        Algodón.

·        Lancetas desechables y estériles

·        Tubos capilares

·        Portaobjetos

·        Pipetas Pasteur

·        Cuba de tinción

·        Pizeta

SUSTANCIAS:

·        Colorante de Wright

·        Buffer de fosfato

·        Alcohol al 70%

·        Agua

PROCEDIMIENTO

1.Una vez seleccionada la zona, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, secar con algodón estéril.

2. Punzar la piel con una lanceta estéril desechable (2 mm de profundidad).

3. La primera gota de sangre se deja perder, limpiándola con la gasa sin tocar la zona pinchada

4. Se espera a que caigan más gotas, sin exprimir el área pinchada porque eso diluiría la sangre con líquido extracelular. *Sobre un portaobjetos, si es necesario estudiar una extensión de sangre. En este caso, se recogió en un portaobjetos.

5.- Tinción de Wright.

6. Observar al microscopio para diferenciar células sanguíneas.

OBSERVACIONES

Frotis sanguíneo 10x

Frotis sanguíneo 40x

Se distinguen la estructura de los eritrocitos, y el núcleo del leucocito al centro, el cual está teñido de color purpura.

Frotis 100x

Se distingue a las dos un codocito o célula en forma de blanco. A su lado izquierdo un linfocito, con su característico núcleo enorme un neutrófilo.

RESULTADOS

Como puede verse, es posible distinguir algunas de las células o elementos formes de la sangre, abundando en gran cantidad los eritrocitos, de los cuales la mayoría presentaba forma redonda con centro pálido, debido a su biconcavidad y otros más eran eliptocitos y solo fue encontrado un codocito como la forma más rara.

CONCLUSIÓN

Se recurre a la punción capilar cuando la cantidad de sangre que se precisa es muy pequeña o cuando por diferentes motivos no pueda practicarse una punción venosa, por ejemplo en los recién nacidos, lactantes, niños donde no se observan adecuadamente las venas, en personas con quemaduras extensas o bien en pacientes que han recibido quimioterapia por cáncer y tienen sus venas fibrosas (duras).

BIBLIOGRAFIA
http://jessicaroldan.blogspot.com/2009/05/apunte-recuento-de-eritrocitos-2lm.html

TECNICA DE CUENTA DE HUEVOS EN HECES LA TECNICA DE STOLL.

OBJETIVO

En esta práctica aprenderemos a realizar un método cuantitativo sobre la presencia de huevecillos.

FUNDAMENTO

Esta técnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923, debido a sus características de accesibilidad en costo y material a utilizar es uno de los más empleados de manera exitosa en encuestas epidemiológicas.

Después de identificar un parasito, puede ser necesario determinar la intensidad de la infestación. Por lo general, la sintomatología de las enfermedades parasitarias se correlacionan con el numero de parásitos presentes, se conoce la eliminación diaria de huevecillos de varias especies de helmintos. Por lo tanto, se hace una estimación del número. Sobre los resultados tienen influencia muchas variables, como dieta, mala ingestión, los ciclos de producción de huevos y la  consistencia de las heces. Pero las cuentas que se realizan antes y  durante el tratamiento, permite guiarlo y las realizadas después se servirán como referencia para el éxito mismo.los mejores resultados s logran cuando las cuentas se realizan en muestra sucesivas obtenidas en un periodo de varios días, de manera que se pueda determinar el promedio diario de liberación de huevos.

MATERIAL

·         Tubo cónico

·         Aplicador

·         Cuentas de vidrio

·         Portaobjetos

·         Cubreobjetos

·         Microscopio

REACTIVOS

·         Hidróxido de sodio

MUESTRA BIOLÓGICA

·         Heces

PROCEDIMIENTO

1.- Llenar el tubo cónico con hidróxido de sodio 0.1N hasta la marca 5.6 ml.

2.-Con un aplicador agregar heces hasta llegar a la marca 6ml del tubo cónico.

3.-Se añaden 5 cuentas de vidrio se tapa y se agita hasta que las heces se desmoronen por completo.

4-Cuando las heces estén disueltas por completo se agita el tubo un minuto y de inmediato se toman 0.075ml de la suspensión y se colocan en un portaobjetos.

5.- Se coloca el cubre objetos.

6.- Se observa en el microscopio.

 OBSERVACIONES

 En la primera muestra se observa restos de alimentos y fibras.

COMENTARIOS

Es una practica muy fácil y rápida de realizar, ya que en las practicas anteriores solo se puede saber si hay presencia de huevecillos, sin en cambio esta es una técnica cuantitativa que te permite ver la presencia de  estos y en que intensidad se presentan. En esta ocasión no encontramos el objetivo pero si ejecutamos correctamente nuestro procedimiento.

Calculo:

1.-La disolución fecal original es el de 1 en 15(4ml/60m,). Como se contaron los huevos en un volumen total de 0.15ml, el numero total de estos en 1ml de heces se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100(1/5 X 0.15 x 100=1).

2.-Suponiendo que el promedio de una persona rebasa los 100g de heces por día, es posible calcular el número de huevos por día multiplicando el resultado por 100(o la cuenta de la suspensión original por 10000).

3.-Para determinar el número de parásitos hembras presentes, se divide el número diario de huevecillos que hay en las heces entre el número promedio de:

Hembra de la especie necátor: 7000 huevos/día.

Hembra de la especie Áscaris: 200000 huevos/ día.

Hembra de la especie Thichuris: 7500 huevos/ día.

4.-Se encuentra la cantidad total de parásitos al multiplicar por dos resultados encontrados en el paso tres, ya que se supone que en cualquier infestación hay un parasito macho por cada parasito hembra.

5.-Algunos técnicos creen que deben utilizar los factores de correlación de la consistencia de las heces para obtener resultados más exactos. Para esto, se debe multiplicar el numero que se obtiene en el paso uno para el factor apropiado. Heces formadas=1, blandas formadas=1.5, blandas diarreicas=3, fluidas diarreicas=4, muy liquidas=5.

 citlaly arteaga - 3dm

TECNICA DE FAUST

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN FLOTACIÓN DE FAUST

OBJETIVO

Buscar en las muestras biológicas la presencia de los distintos parásitos para tener un conocimiento más amplio sobre ellos.

FUNDAMENTO:

Se conoce como técnica de Faust, ya que fue él quien la diseño en 1938. Es una de las más populares, se utiliza prácticamente en todos los laboratorios del sector salud y privados.

Ventaja y Desventajas
Esta técnica es mejor para quiste y protozoos que para huevos y larvas de helmintos. El éxito depende de la exactitud en la densidad del sulfato de Zinc. El contacto prolongado con el sulfato de zinc, puede deformar los quiste y dificultar su identificación, por lo tanto estas preparaciones debe ser examinan lo antes posible

MATERIAL

·         Porta objetos.

·         Cubreobjetos.

·         Gasas.

·         Tubos de ensayo.  

       Embudo

             Solución acuosa de sulfato de Zn.

Baso de presipitado

 Abate lenguas

Muestras biológicas

·         Heces

PROCEDIMIENTO:

1) Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.

2) Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un embudo pequeño.

3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.

4) Decantar el liquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Re suspender el sedimento.

5) Repetir el procedimiento hasta 2 veces hasta que el liquido sobrenadante este listo.

6) Decantar nuevamente el líquido sobrenadante remplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minutos por 1500 rpm.

7) Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del liquido. Colocarlos en un porta-objeto y mezclar con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto

8) Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

Método indicado para el diagnostico de huevos livianos de helmintos (Necator, Tricocefalos, Áscaris, H.nana).

Observaciones

                   

En la primera muestra trabajada solo encontramos grasa.               

En la segunda muestra trabajada se observaron jabones, residuos vegetales grasa y fibra.

CONCLUSIONES

La finalidad de la practica es la búsqueda de parásitos hasta el momento no hemos encontrado. Con la práctica continua llegaremos a encontrarlos. En las practicas anteriores  y en esta ultima solo hemos hallado grasa, fibra .y restos vegetales e incluso creímos encontrar una amiba pero  no era así solo se trataba de una fibra.

METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS

METODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN DE WILLIS

FUNDAMETO: este método esta recomendado especialmente para la investigación de protozoarios y helmintos. Consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio.

Los huevos y quistes de peso específico a la solución de cloruro de sodio tienden a flotar.

PROTOZAORIOS:

Son animales unicelulares que se presentan aislados o en colonias y varían en morfología y fisiología.

Los protozoarios dañan, afectan y se reproducen en las siguientes partes cavidades, sangre, intestinos, tejidos.

Estos animales pueden vivir en el aire, tierra y agua (Vida libre) y también pueden vivir como parásitos en otro ser vivo (agente o huésped) también se pueden encontrar en un huésped intermediario o en uno definitivo.

Los protozoarios en su mayoría son heterotrofos y tienen las siguientes funciones reproducción, nutrición excreción y protección.

Se transmiten en forma directa e indirecta por medio del agua, alimentos contaminados, tierra y materia fecal y pueden ser por 4 vías aérea, oral, cutánea y cavidades.

MATERIAL:

Vaso de precipitados

Embudo

Gasa

Porta objetos

Cubre objetos  

Abate lenguas

REACTIVOS:

Sol. Saturada de NaCl

Sol. De yodo lugol

MATERILA DE SEGURIDAD:

Bata

Cubre bocas

Guantes

PREOCEDIMIOENTO:

1.-  tomar aprox. 1 gr de heces fecales con un abate lenguas

2.-  en vaso de precipitados poner 10ml de solución saturada de cloruro de sodio, echarle el gramo de heces fecales y disolver.

3.-  en el embudo con la gasa ya puesta en forma de cono, se filtra la mezcla a forma que caiga en e tubo de ensaye llenando completamente el tubo.

4.- coloque un porta objetos con cuidado sobre le tubo, de manera que el liquido haga contacto con el cubre objeto

5.- dejar reposar de 5 a 10 minutos

6.- los quiste o huevos flotaran y quedara adheridos a la cara del porta objetos que esta en contacto con la mezcla.

7.- retirar cuidadosamente el porta objetos para evitar perdida de material, colocar una gota de yodo lugol y ponerle el cubre objetos.

8.- examinar la muestra al microscopio con objetivo 40x, buscando quistes o huevecillos de parásitos.

CONCLUCION: este método se aplica en consultorios.

 OBSERVACINES: lo que observamos fueron quistes de E.Hirtolytica